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小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒

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  1. 更新日期:2016-07-24 23:28
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详细介绍
 本试剂盒只能用于科学研究不得用于医学诊断   小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒使用说明书 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 试剂盒名称】 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 试剂盒用途】 定量小鼠血清、血浆及相关液体样本中抗透明带抗体(aZP) 的含量 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被抗透明带抗体(aZP) 透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中抗透明带抗体(aZP) 浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中抗透明带抗体(aZP) 含量。 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 试剂盒组成】
1   酶标包被板 12孔×8条 7 底物夜A 6mL
2   标准品:200ng/ml 0.6mL 8 底物夜B 6mL
3   20倍浓缩洗涤液 20mL 9 终止液 6mL
4   标准品稀释液 6mL 10 说明书 1份
5   样本稀释液 6mL 11 封板膜 1张
6   酶标试剂 6mL 12 密封袋 1个
备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材 1、37℃恒温箱 2、 标准规格酶标仪 3、 精密移液器及一次性吸头 4、 蒸馏水 5、 一次性试管 6、 吸水纸 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒操作步骤】 1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。 2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。 4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。 6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。 7、温育:重复4的操作。 8、洗板:重复5的操作。 9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。 10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。 11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。 12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 样本要求】 1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。 2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。 3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒注意事项】 1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。 2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。 3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。 4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。 5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。 6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。 7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。 8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。 9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。   小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒操作程序总结】 准备试剂,样品和标准品    加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟   洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟   洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟   加入终止液   15分钟之内读OD   计算   小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒检测范围 0.1-200ng/ml 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒规格】 96T/盒、48T/盒 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒贮藏】 2-8℃,避光防潮保存。 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒有效期】 6个月
 
 
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